Monoclonal antibody
 
 
一、技术介绍
  单克隆抗体是由一种识别某一特定抗原决定簇的B淋巴细胞分泌的抗体，具有特异性强、灵敏度高、来源稳定等优点。杂交瘤技术是目前单克隆抗体制备的主要方法，其原理是通过B细胞与骨髓瘤细胞融合，获得可以连续分泌抗体并能增殖培养的单克隆杂交瘤细胞株。
  如果需要进一步保证单克隆抗体的生产稳定性，我们可以提供对杂交瘤细胞单克隆抗体的测序服务，通过高效的蛋白表达平台生产稳定性更高的单克隆抗体。
武汉科谨生物拥有成熟的抗原设计和制备技术，可以提供从抗原制备到抗体制备的一站式技术服务。

 
二、单克隆抗体制备流程
（1）免疫动物 
免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的过程。一般选用6-8周龄雌性Balb/c小鼠，按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。
（2）细胞融合 
无菌操作取出小鼠脾脏，制备脾细胞悬液。将同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合，并加入PEG促进淋巴细胞与骨髓瘤细胞发生融合，形成杂交瘤细胞。 
（3）HAT选择杂交瘤细胞  
在HAT培养基中，未融合的骨髓瘤细胞因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶，不能利用补救途径合成DNA而死亡。未融合的淋巴细胞本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。只有融合的杂交瘤细胞能在HAT培养基中存活和增殖。 
（4）杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 
对HAT培养基中生长的杂交瘤细胞进行抗体阳性筛选和克隆化并及时进行冻存。
 
三、服务内容
 
四、交付结果
1、Protein A/G纯化或抗原亲和纯化的单克隆抗体1-2mg，纯度>90%；
2、1-2株杂交瘤细胞株；
3、完整的实验报告；
4、武汉科谨生物提供单克隆抗体效价保证>1:64000，保证Western blot实验抗体能检测到抗原。
 

 

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