transfection

一、技术介绍：
转染是将外源遗传物质导入真核细胞的过程,是细胞和分子生物学研究的重要用于研究基因表达对细胞生理水平的影响。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例；化学介导方法中脂质体转染方法较为常用；生物介导方法现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。理想细胞转染方法，应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。
根据外源基因是否整合到细胞基因组上，又可将转染分为瞬时转染和稳定转染。
 
二、服务内容：

细胞系瞬转：脂质体转染法是细胞系瞬时转染最常用的方法之一。脂质体利用脂质膜包裹DNA，借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体，DNA并没有预先包埋在脂质体中，而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上，形成DNA-阳离子脂质体复合物，从而吸附到带负电的细胞膜表面，经过内吞被导入细胞。
 
稳定细胞系构建：将外源DNA克隆到具有抗性基因的载体上并包装成慢病毒，通过慢病毒感染细胞，将外源DNA整合到目的细胞基因组，利用抗性标记如嘌呤霉素(puromycin)、新霉素（neomycin）、潮霉素（hygromycin）等对细胞进行加压筛选，获得目的基因长时间稳定表达的细胞株。
 
三、技术服务优势 ：
1.武汉科谨生物拥有专业的细胞技术团队，精湛的操作水平；
2.我司细胞库有多种细胞系可供客户使用；
3.高效的慢病毒包装系统，多种慢病毒可供选择；
4.技术服务周期短。
 
四、服务流程：
 
  
五、交付数据及产品：
1. 完整的实验过程报告；
2. 数据分析结果（发表级图片形式）;
3. 转染细胞株
 
六、实验结果展示：

图A：外源基因转染荧光显微镜照片；
图B：过表达蛋白western blot验证；
图C：过表达基因qRT-PCR验证
 
 

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